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Evaluación analítica de ensayos basados en quimioluminiscencia para la medición de autoanticuerpos en diabetes tipo 1

Validación de Dengue virus NS1 Ag de Dia.Pro: resultados de un laboratorio público de referencia del GCBA 

Introducción 

Según lo reportado en el Boletín Epidemiológico Nacional 735, correspondiente a la semana epidemiológica (SE) 50 (8/12 al 14/12), publicado el 23 de diciembre de 2024, se notificaron 32.459 nuevos casos sospechosos de dengue durante la SE 48 en la subregión de las américas Cono Sur. Hasta esta semana, considerando desde el inicio de 2024, esta área mostró un incremento del 252% en comparación con la misma semana de 2023 y del 435% con respecto al promedio de los últimos 5 años. En Argentina, en particular, desde el año 2010 se evidencia una notable disminución en los intervalos interbrote, tendencia que se ha acentuado en los últimos cinco años, siendo los años 2023 y 2024 escenario de dos brotes de magnitud sin precedentes, concentrando el 83% del total de casos históricos registrados en el país. 

En los últimos cinco años, Argentina registró un aumento sostenido de casos de dengue, con brotes en áreas sin antecedentes. Desde 2023, se observa circulación viral invernal en el NEA y un adelanto en los casos, indicando cambios en la temporalidad. Desde la SE42 hasta la SE47, se observa un incremento progresivo en la detección de casos confirmados, pasando de menos de 10 casos semanales a 29 en la SE47. En las últimas 3 semanas los casos confirmados oscilaron entre los 11 y 19 casos. 

Los casos se presentaron durante todas las semanas a expensas de las notificaciones aportadas por la provincia de Formosa. Desde la SE42, se notificaron los primeros casos sin antecedente de viaje en la región Centro correspondiente a la provincia de Córdoba. Posteriormente, se notificaron casos aislados sin antecedente de viaje en otras jurisdicciones (Mendoza, Tucumán, CABA, Buenos Aires, Entre Ríos, Salta y Santa Fe). 

En relación con la distribución de los serotipos hallados, se observó una mayor prevalencia de DENV-2 (65,6%), mientras que los casos a DENV-1 alcanzan un 32,2%. Dos hallazgos de DENV-3 y un único de DENV-4, correspondieron a notificaciones de casos con antecedente epidemiológico de viaje. 

En este contexto epidemiológico, caracterizado por el aumento sostenido de casos, la expansión geográfica del dengue a regiones previamente no afectadas y la circulación simultánea de múltiples serotipos, resulta imprescindible contar con herramientas diagnósticas que sean altamente sensibles y específicas, que permitan la clasificación inequívoca de los casos sospechosos, sin importar su serotipo. La disponibilidad de métodos confiables no solo permite una detección temprana y precisa, sino que también fortalece las estrategias de control y monitoreo necesarias para mitigar el impacto del virus. 

Dengue virus NS1 Ag de DIA.PRO es un ensayo inmunoenzimático (ELISA) cualitativo y semicuantitativo, diseñado para la determinación del antígeno NS1 en muestras de plasma o suero humano. Permite la detección temprana de la infección, lo que es fundamental para la identificación y el tratamiento adecuado de los pacientes. 

Recientemente, la división Análisis Clínicos a través de la Unidad de Virología del Hospital de Infecciosas “Francisco Javier Muñiz” realizó una prueba comparativa, con el objetivo de evaluar el desempeño del producto. El análisis realizado incluyó 50 muestras de suero provenientes de pacientes con síndrome febril agudo, conservadas a -20°C. El tiempo promedio desde el inicio de los síntomas fue de 4 días. 

Las muestras estudiadas fueron clasificadas previamente mediante RT-qPCR y ELISA para Ag NS1. De estas, 26 fueron positivas para dengue por RT-qPCR (10 de serotipo DENV-1, 10 de serotipo DENV-2 y 6 de serotipo DENV-4); 2 poseían resultado negativo para Ag NS1, pero RT-qPCR detectable, específicamente para el serotipo DENV-4; y las restantes 22 fueron negativas para Ag NS1 y RT-qPCR. El resultado de RT-qPCR se consideró como el gold standard para la validación.

Resultados 

A continuación, se muestra la tabla con los resultados obtenidos:

Lo expuesto demuestra una sensibilidad del 100% al compararlo con la RT-qPCR para el diagnóstico, así como una especificidad también del 100%. Esto significa que el ensayo fue capaz de detectar correctamente todas las muestras positivas y negativas, sin falsos positivos ni negativos. 

Además, se logró una concordancia global del 100% al comparar los resultados con otros ensayos ELISA y CLIA utilizados como referencia. 

En cuanto a la detección por serotipo, los resultados fueron igualmente satisfactorios: 

• DENV-1: 100% de detección (10/10 muestras), 

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• DENV-2: 100% de detección (10/10 muestras), 

• DENV-4: 100% de detección (8/8 muestras). 

Conclusiones 

Dengue virus NS1 Ag ha demostrado ser una herramienta altamente eficaz para el diagnóstico de la infección por dengue en sus distintos serotipos. Los resultados obtenidos en este estudio revelan una sensibilidad y especificidad del 100%. El ensayo fue capaz de detectar de manera efectiva el serotipo DENV-4, incluso en muestras que previamente habían arrojado un resultado negativo para Ag NS1 con otros ensayos. Este punto es fundamental, dado que la disminución en la sensibilidad para los serotipos DENV-2 y DENV-4 ha sido previamente reportada en otros ensayos para Ag NS1. 

Por lo tanto, Dengue virus NS1 Ag se posiciona como una excelente herramienta de diagnóstico para el dengue. Su desempeño destacado confirma su utilidad no solo para la vigilancia epidemiológica, sino también para fortalecer las posibilidades diagnósticas un contexto donde puedan presentarse casos importados con un serotipo aún no circulante localmente. Además, su alta sensibilidad y especificidad contribuyen a un diagnóstico temprano y preciso, clave para optimizar el manejo clínico del paciente. 

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Expresamos nuestro más sincero agradecimiento a la Unidad de Virología del Hospital de Infecciosas “Francisco Javier Muñiz”, por su valiosa colaboración con la realización de este estudio. 

Características 

• Kit para 96 determinaciones. 

• Ensayo cualitativo o semicuantitativo. 

• Microplaca recubierta con anticuerpos monoclonales de ratón específicos para capturar el antígeno NS1 del virus del dengue. 

BERNARDO LEW

• Posibilidad de realización tanto manual como automatizada. 

• Alta sensibilidad y especificidad.

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