Estimados:

Desde hace varios años ORGENTEC ha centrado su atención en las moléculas target basadas en vimentina para los ensayos diagnósticos de detección de ACPA.

La Vimentina Citrulinada Mutada (MCV) es la proteína target propia del organismo.

Firmemente comprometido con esta estrategia, ORGENTEC desarrollo el ELISA anti MCV® (Vimentina Citrulinada Mutada). Ahora los últimos resultados de investigación confirman la correcta estrategia de ORGENTEC.

Dra. Patricia Etchevés

Co-Directora Técnica Bioars S.A

Los autoanticuerpos dirigidos contra las proteínas citrulinadas (ACPA) se encuentran en las personas con artritis reumatoide (AR); siendo uno de los factores de riesgo más importantes de la destrucción ósea en esta enfermedad. Un estudio reciente finalmente vincula directamente la formación de anticuerpos anti vimentina citrulinada mutada (anti-MCV) a la pérdida ósea en la artritis reumatoide, lo que indica que estos autoanticuerpos actúan sobre los osteoclastos, las células óseas responsables de la resorción ósea.

Induction of osteoclastogenesis and bone loss by human autoantibodies against citrullinated vimentin

Los ACPA se asocian con un aumento de la resorción ósea Harre U, Georgess D, Bang H, Bozec A, Axmann R, Ossipova E et al. Induction of osteoclastogenesis  and bone loss by human autoantibodies against citrullinated vimentin. J Clin Invest 2012; 122(5):1791-802.(1)

La investigación de U. Harre y G. Schett, proporciona fundamentalmente nuevos conocimientos sobre la interacción entre el hueso y el sistema inmunológico en el proceso inflamatorio que lleva al desarrollo de la artritis reumatoide.

Hay dos aspectos principales que determinan el cuadro clínico de enfermedades reumáticas: en primer lugar, la activación inmune crónica, la producción de autoanticuerpos y la acumulación de células del sistema inmune adaptativo  en los sitios de inflamación, y segundo, un daño progresivo del tejido musculo-esquelético, que conduce a deterioro funcional, dolor y discapacidad. (2) Por lo tanto, un conocimiento más profundo de las interacciones mutuas entre el sistema inmune y el hueso brindarían las bases para la comprensión de los procesos fisiopatológicos que conducen al desarrollo de las enfermedades reumáticas.

La presencia de autoanticuerpos contra las proteínas citrulinadas (ACPA) es un fuerte predictor para la AR erosiva ósea, sugiriendo una asociación directa de la respuesta de autoanticuerpos y el daño óseo estructural. En particular, los anticuerpos contra vicentina citrulinada mutada (anti-MCV) son altamente específicos para la AR y el antígeno de la proteína vimentina citrulinada mutada se expresa en las células mononucleares y osteoclastos.

Los ACPA se asocian con un aumento de la resorción ósea

En primer lugar, U. Harre y colaboradores analizaron las muestras de suero ACPA-positivas de pacientes con AR para los marcadores biológicos de resorción ósea y formación ósea, y compararon estos resultados con las muestras ACPA-negativos de los pacientes con AR y controles sanos. Ellos observaron que la presencia y los niveles de ACPA se correlacionaron con una mayor cantidad de diferentes marcadores séricos de resorción ósea en pacientes con artritis reumatoide. En contraste, los marcadores de formación ósea no mostraron diferencias entre los pacientes con AR con o sin ACPA. Estos datos documentan la relación directa de la presencia de ACPA en la destrucción ósea y apoyan la hipótesis de que ACPA puede provocar pérdida de masa ósea al interferir con el metabolismo óseo.

La Vimentina Citrulinada Mutada está involucrada en la patogénesis de la AR

Los autoanticuerpos contra vimentina citrulinada mutada son marcadores diagnósticos establecidos para la AR (3, 7, 8); la producción de estos anticuerpos es altamente específica para la enfermedad. Además, se ha demostrado, que los niveles de anti-MCV están elevados en el líquido sinovial de pacientes con AR sugiriendo que hay producción local de anticuerpos o bien la retención de estos autoanticuerpos en el sitio de la inflamación está controlada por genes de predisposición de AR (9).

En los últimos años, varios estudios han demostrado el papel de vimentina como un autoantígeno clave en la patogénesis de la AR: Feitsma et al. (10) identificaron dos péptidos naturalmente transformados de la vimentina que se unen a HLA-DRB1 * 0401- LT de restricción, en una manera citrulinada específica. Estos péptidos fueron reconocidos por las células T en los pacientes con AR con el genotipo La Vimentina Citrulinada Mutada está involucrada en la patogénesis de la AR HLA-DR4 ACPA-positivos. De manera similar, Snir et al. (11) encontró células T con reactividad para vimentina citrulinada en pacientes con artritis reumatoide HLA-DRB1 * 0401-positivos y controles sanos. Una respuesta proinflamatoria fue detectable exclusivamente en los pacientes con AR.

Tabushi et al. (12) realizaron un análisis basado en la proteómica del líquido sinovial de pacientes con AR y detectaron tres proteínas citrulinadas – fibrinógeno citrulinado, fibronectina citrulinada y vimentina citrulinada. Asimismo, con Western blots, las imágenes 2D de gel de extractos de tejido sinovial citosólico y por medio de la espectrometría de masa, Tilleman et al. (13) identificaron isoformas citrulinadas de vimentina en pacientes con artritis inflamatorias. Ellos encontraron presencia de autoanticuerpos contra estas formas procesadas de vimentina citrulinada asociados principalmente a los pacientes con AR, sugiriendo un posible origen de la respuesta inmune ACPA en la AR.

Van Steendam et al. (14) analizaron los antígenos de los inmunocomplejos de sueros de personas sanas, pacientes con AR y de líquido sinovial de pacientes con artritis reumatoide y en pacientes con espondiloartropatías (SpA). Detectaron fibrinógeno-beta citrulinado y vimentina citrulinada sólo en líquido sinovial de pacientes con AR, ACPA-positivos. Ningún antígeno citrulinado estaba presente en los inmuncomplejos de líquido sinovial de los pacientes con AR ACPA-negativos o los pacientes SpA, o en los inmuncomplejos de suero de los pacientes con AR y en voluntarios sanos.

Estos hallazgos refuerzan la hipótesis de que la vimentina citrulinada juega un papel importante en la patogénesis de RA.

Los anticuerpos anti-MCV estimulan directamente la diferenciación de las células de resorción ósea in vitro

Para aclarar aún más como los autoanticuerpos con especificidad a vimentina citrulinada mutada pueden contribuir a la destrucción ósea, el equipo de Schetts junto con científicos de ORGENTEC desarrollaron un método eficiente para la purificación de los ACPA humanos, y caracterizaron su frecuencia y el patrón de especificidad. Los investigadores aislaron anticuerpos anti-MCV directamente de la sangre de los pacientes con AR. Estos anticuerpos purificados humanos naturales mostraron especificidad a péptidos de la vimentina citrulinada, pero no a los péptidos no citrulinados de vimentina y no reconocieron péptidos citrulinados de otras proteínas. Además, los anticuerpos purificados humanos anti-MCV se unían a la superficie y al citoplasma de los osteoclastos cultivados, indicando la expresión de vimentina citrulinada en estas células.

En los ensayos de diferenciación de los osteoclastos el agregado de los anticuerpos anti-MCV aumentó la formación de células progenitoras de osteoclastos e indujo su diferenciación en células óseas maduras de reabsorción. Al evaluar la resorción ósea en un ensayo de cultivo de células, los investigadores observaron una relación dosis-dependiente de la concentración de anticuerpos y el aumento de la resorción ósea mediada por osteoclastos.

Los anticuerpos anti-MCV estimulan la producción de alfa-TNF e inducen la pérdida ósea in vivo

En ratones deficientes en linfocitos, la inyección de anticuerpos anti-MCV induce la pérdida de masa ósea. Esto parece estar mediado por un mayor número de precursores de los osteoclastos y por la diferenciación aumentada de los osteoclastos en respuesta a la unión de los anti-MCV. Los ratones expuestos a anticuerpos anti-MCV mostraron un incremento en los niveles sistémicos de alfa-TNF, una citoquina que desempeña un papel central en la patogénesis de la AR. La interacción con los anticuerpos anti-MCV indujo la producción de alfa-TNF por los precursores de osteoclastos. A su vez, el alfa-TNF promueve la migración de los progenitores de osteoclastos de la médula ósea a los órganos linfoides y estimula su diferenciación en osteoclastos maduros. Por lo tanto, la presencia de anti-MCV afecta la osteoclastogénesis y la resorción ósea mediada por alfa-TNF.

En resumen, estos datos demuestran la relación directa entre la formación de autoanticuerpos y la destrucción ósea en la artritis reumatoide y amplían los conocimientos actuales sobre la interacción del sistema inmune y el sistema óseo en la autoinmunidad.