Revista Bioreview Edición 10 - Marzo 2020

BIODIAGNOSTICO

 

Verificación de un ELISA de medición de 25 hidroxi vitamina D

Vilche Juarez A.1; Coniglio S. 2; Arechavaleta, M. 1; Merelli, MR; Quiroga S. 1,2

1 IUC, Instituto Universitario CEMIC, Valdenegro 4337, CABA, Argentina.
2 Departamento de Análisis Clínicos, CEMIC, Centro de Educación Médica e Investigaciones Clínicas, Galván 4102. CABA. Argentina.

Instituto Universitario CEMIC, Galván 4102, C1431FWO, Buenos Aires, Argentina - vilchejuarez@gmail.com

Introducción 

La 25hidroxi vitamina D (25OHD) participa en la absorción activa del calcio y en la regulación de la homeostasis. Se considera deficiencia de vitamina D a valores séricos <20 ng/mL, siendo insuficiente entre 20-30 ng/mL. La deficiencia de esta vitamina tiene relación con muchas patologías como osteoporosis, raquitismo, cáncer y enfermedades vasculares. En la actualidad existen inmunoensayos automatizados, inmunoensayos manuales y métodos de detección directa. Es bien conocido que, a pesar que los métodos actuales miden Vit D “total”, la selectividad de los mismos no es siempre comparable, clasificando de manera diferente a la población en estudio. Cuando se introduce un nuevo método, en el presente trabajo un ELISA Vit D “total”, es muy importante compararlo con otras metodologías ya en uso en nuestro medio.

Objetivos

Evaluar el método de ELISA Calbiotech para el dosaje de 25-hidroxivitamina D total, estimando su precisión y comparándolo con un método en uso.

Materiales y Métodos

Se analizaron 172 muestras de pacientes ambulatorios del Hospital Universitario CEMIC sede Saavedra en el período Mayo - Julio 2018, cuyas concentraciones de 25OHD cubrieron el rango de medición, principalmente con valores cercanos los de decisión clínica. 

Se utilizaron 5 muestras repetidas 5 veces para estimar la precisión del método de ELISA. 

El procedimiento de ELISA manual de Calbiotech se comparó con el EQLIA de Roche Diagnostics (Cobas601) en uso en el laboratorio. Se analizaron los resultados por medio del programa estadístico IBM SPSS.

Resultados

Las 5 muestras utilizadas para evaluar la precisión presentaron un coeficiente de variación de entre 3,08 – 8,93%. Siendo la de mayor CV, la de
menor concentración. (Tabla 1).

El rango de concentración de las muestras analizadas de 25OHD para el método COBAS fue de 5,23 – 64,60 ng/mL (media: 28,44 ng/mL) y para el método ELISA 5,92 – 73,75 ng/mL (media: 25,66 ng/mL).

La correlación entre ambos métodos fue de 0,891. (Fig. 1)

De las muestras analizadas, 115 tuvieron valores hasta 30ng/mL por EQLIA, la regresión lineal fue de 0,873. La medias fueron de 18,48 ng/mL en EQLIA y 16,78 ng/mL en ELISA (p<0,0001).

Conclusiones

La precisión del método de ELISA fue aceptable, indicando el grado de concordancia entre los resultados obtenidos al aplicar el mismo proceso
experimental repetidas veces.

El ELISA estudiado demostró ser una buena herramienta en todos los rangos evaluados, siendo útil como método para seguimiento de pacientes
utilizando ambas metodología.

Laboratorios BACON S.A.I.C

Tel: +54 11 4709 0171

Fax: +54 11 4709 2636

www.bacon.com.ar

ventas@bacon.com.ar 

Introducción 

La 25hidroxi vitamina D (25OHD) participa en la absorción activa del calcio y en la regulación de la homeostasis. Se considera deficiencia de vitamina D a valores séricos <20 ng/mL, siendo insuficiente entre 20-30 ng/mL. La deficiencia de esta vitamina tiene relación con muchas patologías como osteoporosis, raquitismo, cáncer y enfermedades vasculares. En la actualidad existen inmunoensayos automatizados, inmunoensayos manuales y métodos de detección directa. Es bien conocido que, a pesar que los métodos actuales miden Vit D “total”, la selectividad de los mismos no es siempre comparable, clasificando de manera diferente a la población en estudio. Cuando se introduce un nuevo método, en el presente trabajo un ELISA Vit D “total”, es muy importante compararlo con otras metodologías ya en uso en nuestro medio.

Objetivos

Evaluar el método de ELISA Calbiotech para el dosaje de 25-hidroxivitamina D total, estimando su precisión y comparándolo con un método en uso.

Materiales y Métodos

Se analizaron 172 muestras de pacientes ambulatorios del Hospital Universitario CEMIC sede Saavedra en el período Mayo - Julio 2018, cuyas concentraciones de 25OHD cubrieron el rango de medición, principalmente con valores cercanos los de decisión clínica. 

Se utilizaron 5 muestras repetidas 5 veces para estimar la precisión del método de ELISA. 

El procedimiento de ELISA manual de Calbiotech se comparó con el EQLIA de Roche Diagnostics (Cobas601) en uso en el laboratorio. Se analizaron los resultados por medio del programa estadístico IBM SPSS.

Resultados

Las 5 muestras utilizadas para evaluar la precisión presentaron un coeficiente de variación de entre 3,08 – 8,93%. Siendo la de mayor CV, la de
menor concentración. (Tabla 1).

El rango de concentración de las muestras analizadas de 25OHD para el método COBAS fue de 5,23 – 64,60 ng/mL (media: 28,44 ng/mL) y para el método ELISA 5,92 – 73,75 ng/mL (media: 25,66 ng/mL).

La correlación entre ambos métodos fue de 0,891. (Fig. 1)

De las muestras analizadas, 115 tuvieron valores hasta 30ng/mL por EQLIA, la regresión lineal fue de 0,873. La medias fueron de 18,48 ng/mL en EQLIA y 16,78 ng/mL en ELISA (p<0,0001).

Conclusiones

La precisión del método de ELISA fue aceptable, indicando el grado de concordancia entre los resultados obtenidos al aplicar el mismo proceso
experimental repetidas veces.

El ELISA estudiado demostró ser una buena herramienta en todos los rangos evaluados, siendo útil como método para seguimiento de pacientes
utilizando ambas metodología.

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